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液相色譜流動(dòng)相的選擇
  • 發(fā)布日期:2021-10-26      瀏覽次數(shù):2078
    •                                                        液相色譜流動(dòng)相的選擇

                                                          檢碩科學(xué)器材(上海)有限公司

      流動(dòng)相

      一個(gè)理想的液相色譜流動(dòng)相溶劑應(yīng)具有低粘度、與檢測(cè)器兼容性好、易于得到純品和低毒性等特征。

      流動(dòng)相選擇

      1、由強(qiáng)到弱:一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或緩沖溶液)進(jìn)行試驗(yàn),這樣可以很快地得到分離結(jié)果,然后根據(jù)出峰情況調(diào)整有機(jī)溶劑(乙腈或甲醇)的比例。

      2、三倍規(guī)則:每減少10%的有機(jī)溶劑(甲醇或乙腈)的量,保留因子(一點(diǎn)中心運(yùn)動(dòng)距離與溶劑前沿運(yùn)動(dòng)距離的比值)約增加3倍,此為三倍規(guī)則。這是一個(gè)聰明而又省力的辦法。調(diào)整的過程中,注意觀察各個(gè)峰的分離情況。

      3、粗調(diào)轉(zhuǎn)微調(diào):當(dāng)分離達(dá)到一定程度,應(yīng)將有機(jī)溶劑10%的改變量調(diào)整為5%,并據(jù)此規(guī)則逐漸降低調(diào)整率,直至各組分的分離情況不再改變。

      幾種溶劑的性質(zhì)

      選擇流動(dòng)相時(shí)應(yīng)考慮以下幾個(gè)方面:

      ①流動(dòng)相應(yīng)不改變填料的任何性質(zhì)。低交聯(lián)度的離子交換樹脂和排阻色譜填料有時(shí)遇到某些有機(jī)相會(huì)溶脹或收縮,從而改變色譜柱填床的性質(zhì)。堿性流動(dòng)相不能用于硅膠柱系統(tǒng)。酸性流動(dòng)相不能用于氧化鋁、氧化鎂等吸附劑的柱系統(tǒng)。

      ②純度。色譜柱的壽命與大量流動(dòng)相通過有關(guān),特別是當(dāng)溶劑所含雜質(zhì)在柱上積累時(shí)。

      ③必須與檢測(cè)器匹配。使用UV檢測(cè)器時(shí),所用流動(dòng)相在檢測(cè)波長(zhǎng)下應(yīng)沒有吸收,或吸收很小。當(dāng)使用示差折光檢測(cè)器時(shí),應(yīng)選擇折光系數(shù)與樣品差別較大的溶劑作流動(dòng)相,以提高靈敏度。

      ④粘度要低(應(yīng)<2cp)。高粘度溶劑會(huì)影響溶質(zhì)的擴(kuò)散、傳質(zhì),降低柱效,還會(huì)使柱壓降增加,使分離時(shí)間延長(zhǎng)。最好選擇沸點(diǎn)在100℃以下的流動(dòng)相。

      ⑤對(duì)樣品的溶解度要適宜。如果溶解度欠佳,樣品會(huì)在柱頭沉淀,不但影響了純化分離,且會(huì)使柱子惡化。

      ⑥樣品易于回收。應(yīng)選用揮發(fā)性溶劑。

                                                                                                                                         本篇轉(zhuǎn)載至實(shí)驗(yàn)之家

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